Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe

Zum Verständnis der Struktur, Funktion und Interaktionen humaner Protein-Komplexe werden diese aus heterologen Expressions-Systemen aufgereinigt und für gewöhnlich röntgenkristallographisch analysiert. Die Hefe Saccharomyces cerevisiae stellt ein effektives und günstiges Expressions-System dar, welches für die Herstellung von Einzel-Proteinen bereits etabliert ist. Ziel dieser Doktorarbeit war es, diesen eukaryotischen Organismus als Co-Expressions-System unter Einsatz kombinierbarer Plasmide zu evaluieren, zur Expression und Aufreinigung humaner Proteinkomplexe zu nutzen und geeignete molekularbiologische Techniken sowie Nachweis- und Aufreinigungsmethoden zu kombinieren und weiter zu entwickeln. Der Fokus dieser Arbeit lag auf dem Onkogen Gankyrin und einigen von dessen ermittelten Komplex-Bindungspartnern, insbesondere MAGE-A4. Gerade dann, wenn Protein-Komplexe schwierig oder gar nicht in den anderen Systemen zu exprimieren sind, ist es außerordentlich wichtig, das alternative Expressions-System Hefe für die Aufreinigung von Protein-Komplexen zu etablieren.