Detektion und Analyse neuer HPV31-Transkripte

In Papillomvirus-infiziertem Gewebe liegt ein zweiphasiger Lebenszyklus des Virus vor. In den undifferenzierten Zellen der unteren Schichten der Epidermis wird über noch unverstandene Kontrollmechanismen eine konstante niedrige Kopienzahl der Virusgenome aufrecht erhalten. Erst in den differenzierenden Zellen der oberen Schichten kommt es zur produktiven Phasen, in der die virale DNA amplifiziert wird und infektiöse Partikel nach Expression der Strukturproteine entstehen. Papillomviren haben ein kleines Genom mit nur neun Leserahmen, erweitern dieses Potential aber durch alternatives Spleißen. Ein alternativ gespleißtes Fusionsprotein konnte bereits als potenter transkriptioneller Repressor charakterisiert werden: E8È2C. In dieser Arbeit konnten neuartige Transkripte mit Spleißdonoren im E1-Leserrahmen aus RNA-Isolaten HPV 16, -18 und -31 positiver Zellen nachgewiesen werden. Diese Transkripte konnten für HPV31 als polyadenyliert mRNAs bestätigt werden. Die Inaktivierung des Spleißdonors SD1534 zeigte eine Phänotyp in der frühen nicht-produktiven Phase. Während die Mutation von SD1534 nur einen geringeren Einfluss auf die initiale virale DNA-Replikation hatte, zeigte sich nach Langzeitkultivierung der virushaltigen Zellen eine drastische Verringerung der Viruskopienzahl. So lässt sich der SD1534 als notwendig für die notwendige Replikation von HPV31-Genomen in langfristigen Kulturen darstellen und eine regulatorische Rolle von Spleißsignalen innerhalb des E1-Gens für die Replikation von Pappillomviren vermuten.