Interaktionspartner des E6-Proteins von Papillomviren und deren Rolle in der Onkogenese

Für die Entstehung von Gebärmutterhalskrebs ist eine persistente Infektion mit Hochrisiko-Papillomviren verantwortlich. Diese Krebsform wird zu etwa 70 % von den HPV-Typen 16 und 18 verursacht, wohingegen andere Hochrisikotypen (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 und 66) seltener Karzinome hervorrufen. Bisher wurden Unterschiede in den Aktivitäten der viralen Onkoproteine E6 und E7 als ausschlaggebend für die Karzinogenität angesehen. Ziel dieser Arbeit war es, diese Korrelationen für die E6-Proteine genauer zu untersuchen. Hierfür wurden ein Aufreinigungsprotokoll und ein daraus abgeleiteter Interaktionsassay für E6-Proteine von Papillomviren etabliert. Mit diesem System ließ sich die Bindung verschiedener E6-Proteine an beschriebene Interaktionspartner von HPV16 oder 18 analysieren. Der Vergleich von vier Hochrisikotypen mit dem HPV18 phylogenetisch nahestehenden, nicht als karzinogen klassifizierten HPV70 zeigte, dass die momentane Risikoklassifizierung weder mit der E6-vermittelten Ubiquitinierung von p53, noch mit der Bindung der, für die p53-Degradation rekrutierten, Ubiquitinligase E6-AP korreliert. Auch die Interaktion mit den PDZ-Proteinen MAGI-1, hDLG und Scribble, über die die E6-Proteine von Hochrisiko-viren die Zellmorphologie und Zellteilung modulieren zu scheinen, wurde für HPV70 E6 nachgewiesen. HPV70 immortalisiert zudem Keratinozyten, was bisher ebenfalls nur für Hochrisikoviren beschrieben wurde. Darüber hinaus konnte gezeigt werden, dass die Bindung dieser PDZ-Proteine bei Hochrisikotypen weniger konserviert ist, als allgemein angenommen. Die E6-Proteine der HPV-Typen 53 und 56 banden nur einen Teil der getesteten PDZ-Proteine, HPV66 E6 interagierte mit keinem dieser Proteine. In früheren Publikationen wurde beschrieben, dass die Bindung an PDZ-Proteine die Immortalisierung von Keratinozyten durch Papillom-viren begünstigt. Diese These wurde durch Immortalisierungsversuche mit zwei Retroviren, die jeweils E6 oder E7 exprimieren, überprüft. In unseren Versuchen verringerte die Mutation der PDZ-Binde domäne weder die Immortalisierungsrate noch die Wachstumsgeschwindigkeit.